一是稀释度的选择。液体样品可直接取原液进行检验;固体或者半固体则必须依据检验经验,选取2-3个适宜稀释度进行检验(一般样品选取1:10,1:100,1:1000三个稀释度进行检验。若遇到不常做的样品,可适当延长稀释度至1:10000甚至更大)。

二是空白实验。分别吸取1mL灭菌生理盐水到平皿中做空白对照,若空白有菌落生长则该实验无效。

三是培养基的倾注。根据对样品污染情况的估计,若样品有表面蔓延生长的可能性,则待第一次倾注的琼脂凝固后,可在表面再覆盖一层琼脂以避免菌落蔓延而难以计数。

四是菌落总数的计算。